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莱菔素及莱菔硫烷抗胃癌活性评价和分子机制的研究

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莱菔素及莱菔硫烷抗胃癌活性评价和分子机制的研究
论文目录
 
摘要第1-7页
ABSTRACT第7-17页
  1. 绪论第17-25页
  1.1 异硫氰酸酯与癌症预防第17-19页
    1.1.1 莱菔硫烷与癌症预防第17-19页
    1.1.2 莱菔素与癌症预防第19页
  1.2 胃癌的相关研究进展第19-24页
    1.2.1 胃癌的分子机制研究进展第20-22页
    1.2.2 抗胃癌的药物研究进展第22-23页
    1.2.3 胃癌研究展望第23-24页
  1.3 课题研究目的与意义介绍第24-25页
  2. 莱菔素和莱菔硫烷的体外抗癌活性评价第25-35页
  2.1 前言第25页
  2.2 材料与方法第25-26页
    2.2.1 实验药物第25页
    2.2.2 实验细胞系第25页
    2.2.3 实验试剂第25-26页
    2.2.4 实验仪器第26页
  2.3 实验方法第26-29页
    2.3.1 细胞培养第27页
    2.3.2 CCK-8法检测细胞生长第27-28页
    2.3.3 统计学分析第28-29页
    2.3.4 克隆形成第29页
    2.3.5 划痕愈合第29页
  2.4 结果与讨论第29-35页
    2.4.1 莱菔素和莱菔硫烷的广谱抗癌作用第29-30页
    2.4.2 莱菔素和莱菔硫烷对胃癌细胞生长的抑制作用第30-32页
    2.4.3 克隆形成和划痕愈合实验第32-33页
    2.4.4 结论第33-35页
  3. 莱菔素和莱菔硫烷的体外抗胃癌分子机制研究第35-61页
  3.1 前言第35页
  3.2 材料与方法第35-37页
    3.2.1 实验试剂第35-36页
    3.2.2 实验仪器第36-37页
  3.3 实验方法第37-44页
    3.3.1 Transwell实验第37页
    3.3.2 流式细胞仪分析细胞周期第37-38页
    3.3.3 流式细胞仪分析细胞凋亡第38页
    3.3.4 Caspase蛋白检测第38-40页
    3.3.5 线粒体膜电位检测第40页
    3.3.6 DAPI核染色第40页
    3.3.7 GSH和GSSG检测第40-41页
    3.3.8 活性氧检测第41页
    3.3.9 蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测蛋白表达水平第41-44页
  3.4 结果与讨论第44-61页
    3.4.1 莱菔素和莱菔硫烷可以阻滞细胞周期第44-46页
    3.4.2 莱菔素和莱菔硫烷可以促进细胞凋亡第46-53页
      3.4.2.1 流式细胞术分析检测细胞凋亡第47-51页
      3.4.2.2 DAPI核染色第51-52页
      3.4.2.3 线粒体膜电位的检测第52-53页
    3.4.3 莱菔素和莱菔硫烷有助于抑制胃癌细胞侵袭转移第53-54页
    3.4.4 莱菔素和莱菔硫烷对于胃癌细胞中还原性谷胱甘肽和活性氧的影响第54-57页
      3.4.4.1 胃癌细胞中还原性谷胱甘肽的检测第54-55页
      3.4.4.2 活性氧检测第55-57页
    3.4.5 蛋白免疫印迹法检测莱菔硫烷对胃癌的细胞蛋白表达水平的变化第57-58页
    3.4.6 结论第58-61页
  4. 莱菔素和莱菔硫烷抗胃癌的靶基因的选择第61-91页
  4.1 前言第61页
  4.2 材料与方法第61-62页
    4.2.1 实验试剂第61页
    4.2.2 实验仪器第61-62页
  4.3 实验方法第62-65页
    4.3.1 RNA-seq分析莱菔素和莱菔硫烷对胃癌细胞基因表达的影响第62页
    4.3.2 RT-PCR及SYBR法荧光定量PCR检测mRNA表达水平第62-64页
    4.3.3 设计并合成ESRP2-siRNA、ADGRA2-siRNA第64页
    4.3.4 筛选并验证靶基因信号通路第64-65页
    4.3.5 Western Blot法检测目的蛋白和目的信号通路的表达水平第65页
  4.4 实验结果与讨论第65-91页
    4.4.1 莱菔素和莱菔硫烷引起胃癌细胞系基因差异表达第65页
    4.4.2 ESRP2是SFA抑制胃癌细胞的一个分子靶标,并抑制EMT-MAPK通路第65-80页
    4.4.3 ADGRA2是SFE抑制胃癌细胞的一个分子靶标,并抑制WNT-β-catenin通路第80-89页
    4.4.4 讨论第89-91页
  5. 莱菔素和莱菔硫烷的抗胃癌体内机制第91-101页
  5.1 前言第91页
  5.2 材料与方法第91页
  5.3 实验方法第91-92页
    5.3.1 体内肿瘤移植模型第91-92页
    5.3.2 免疫组织化学(Immunohistochemistry, IHC)检测靶基因信号第92页
  5.4 结果与讨论第92-101页
    5.4.1 莱菔硫烷的动物实验结果第92-95页
    5.4.2 莱菔素的动物实验结果第95-97页
    5.4.3 靶基因的蛋白表达水平第97页
    5.4.4 免疫组织化学结果分析第97页
    5.4.5 结论第97-101页
  6. 结论、创新点及展望第101-105页
  6.1 结论第101-102页
  6.2 创新点第102-103页
  6.3 展望第103-105页
参考文献第105-113页
致谢第113-115页
作者和导师简介第115-117页
附件第117-118页

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